環境Q&A

No.2356 【A-1】

Re:大腸菌測定の培地調製について

2003-05-11 00:58:57 きた （

>コツがあったら教えてください。
>�Cすぐに5℃冷蔵室に入れ冷やす。
　コツかどうか分かりませんが、水道水で急冷していました。
　冷蔵庫より早く冷えると思います。
　しかし、なぜそうするのかは分かりません。

用水・排水中の大腸菌群試験方法
　JIS K0350-20-10：２００１
６．２ 　液体培地による試験（最確数試験）
　ブリリアントグリーン−ラクトース−胆汁−ブロス（ＢＧＬＢ培地）を用いて。36±１℃で48±３時間培養し、最確数法によって大腸菌群数を求める。
６．２．１　試薬及び培地　試薬及び培地は、次による。
ｃ）ブリリアントグリーン−ラクトース−胆汁−ブロス培地（ＢＧＬＢ培地）
（５）　ペプトン…ダーラム発酵管（中試験管）に10mlずつ移し入れ、3.5b)の高圧蒸気滅菌を約15分間行って手早く冷水中に浸して冷却した後、冷暗所に保存する。ダーラム管内に気泡が残留しているものは使用しない。

No.2358 【A-2】

Re:大腸菌測定の培地調製について

2003-05-11 17:21:25 きた （

http://www.cosmokai.com/manualpage/manual04.html
(5) 滅菌する培地で試験管を使用するものは、加温溶解した培地を試験管に必要量分注してからオートクレーブをかけます。乳糖ブイヨン培地やBGLB培地などのダラーム管を用いてガスの発生を検査する培地は、滅菌後流水で急冷します（自然放冷するとダラーム管内に空気が残留してしまうことがあります。）

No.2359 【A-3】

Re:大腸菌測定の培地調製について

2003-05-11 19:21:25 きた （

　何故、急冷するのかということを考えてみました。これが実際に効果があるとしての話ですが？
　急冷すれば、ダーラム管がある内側と外の試験管に近い方の培地とに温度差ができ、高い温度に溶けにくいガスは冷やされた外側の培地に移動する・・・のではないかということです。
　すると、先に考えた理由も効果があるかということになりますが、急冷しなくともガスが抜けるようですので、急冷は念のためという程度のことでしょうか。
　実際に確かめてた方はいらっしゃいませんでしょうか。

http://www.eic.or.jp/QA/bbs02.php3?serial=1727
Ｑ.大腸菌測定のダーラム管について
NORTH　北海道　2003年02月05日 19時21分 　No.1727
河川や飲料水などの大腸菌群を測定する際（最確数法など）、試験管にダーラム管を入れてオートクレーブにかけると、ダーラム管内の空気がすべて抜けてしまいます。
とても単純な質問なのですが、なぜ抜けてしまうのでしょうか？

No.2508 【A-5】

Re:大腸菌測定の培地調製について

2003-06-01 20:00:47 きた （

>加温溶解後、試験管に分注する時の、培地の温度は

影響はないと思います。これも確かめた訳ではないのですが、時間の制約上ほどほどに冷えた時点で分注していました。計量はいいかげんでよいので、計量器は２０℃で行う必要はなく、約１０mlと考えていました。